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一种离体体液中蛋白质的预处理方法

一种离体体液中蛋白质的预处理方法,通过一定比例的高分子聚合物溶液在低温条件下从离体体液(血液和尿液等)中提取出蛋白质,加入一定浓度的表面活性剂和蛋白质还原剂在高温条件下使蛋白质快速变性,加入可与蛋白质巯基快速反应的固相烷基化试剂,该试剂可选择性与蛋白质上的巯基反应,离心后,反复清洗固相颗粒表面去除其它干扰小分子(如糖、盐、表面活性剂、脂类等),获得高纯度的蛋白质,最后加入蛋白酶将体液蛋白质酶解成肽段后,离心后获得的产物可直接采用液相色谱‑质谱系统进行分析。与传统的体液蛋白质预处理方法相比,该方法具有操作简单、重复性好、预处理通量高等优点。